一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對(duì)含鈣組織最好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗(yàn),如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機(jī)酸、無(wú)機(jī)酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。
EDTA 是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類,EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。
本EDTA脫鈣液主要由EDTA、磷酸鹽等組成, pH值為7.2。其優(yōu)點(diǎn)是:①經(jīng) EDTA 脫鈣的組織染色結(jié)果好;②對(duì)組織的結(jié)構(gòu)損害小。其缺點(diǎn)是:①脫鈣速度很慢,不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用;②脫鈣后組織會(huì)稍微變硬;③不宜用化學(xué)方法確定脫鈣終點(diǎn)。
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