1、最快速的電泳操作:
一次性灌注分離膠、濃縮膠(自動分層),不但最大程度的降低了凝膠時間,同時有效的提高了凝膠的成功率,可以在最短的時間內(30-40min)呈現(xiàn)最好的電泳結果。
2、最安全的PAGE系統(tǒng):
全球首款低丙烯酰胺系統(tǒng)的成功應用,配合獨有的APS引發(fā)體系,不但改善了液相中自由基的生成,保證快速有效的成膠,同時極大的預防了有害成份對實驗者健康的損害。
3、最高的性價比:
Genshare CFAS any KD PAGE實現(xiàn)了預制膠的便捷性與自制膠的經濟性的完美結合,為科研工作者提供最便捷的蛋白研究工具。
4、最寬的分子量檢測范圍:
獨有的凝膠緩沖體系使凝膠具有更好的交聯(lián)率和更均勻的孔徑,因而可以保證10-200KD蛋白在凝膠中具有良好的線性,因此可以滿足絕大多數(shù)蛋白電泳的需求。
操作步驟:
1、取2支小燒杯(小試管亦可),在第一個小燒杯中加入試劑盒中的Genshare CFAS any KD PAGE濃縮膠A液1.0ml +Genshare CFAS anyKD PAGE濃縮膠B液1.0ml;在另一個燒杯中加入Genshare CFAS anyKD PAGE分離膠A液2.5ml + Genshare CFAS anyKD PAGE分離膠B液2.5ml;
2、在5ml的分離膠溶液中加入10%APS 50ul,輕輕攪拌使其混勻,避免產生氣泡;
3、在凝膠模具中灌入適量混勻的A液(對于mini-gel,凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5cm或距梳齒約0.5cm即可);
4、在2ml的濃縮膠液中加入10%APS 20ul,輕輕攪拌使其混勻后直接灌入凝膠模具中A液的上層(不需要等待A液凝固);
5、將梳子插入凝膠內,靜置10~15分鐘,等待濃縮膠聚合;
6、待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔;
7、調整電泳儀為恒壓300v,進行電泳操作,約30min完成蛋白電泳實驗。(300v為絕大多數(shù)電泳儀設計可承受電壓,正常使用不會損壞儀器。如有擔心可以適當降低電壓至250v,對電泳速度不會有明顯影響。)
注意事項:
1、本試劑盒能夠一次性完成濃縮膠和分離膠的制備不會發(fā)生濃縮膠和分離膠相互混合的情況;
2、由于本產品具有快速凝膠的特點,在凝膠配制過程中最好遵循操作說明使用,不要將分離膠灌入凝膠模具后,才開始配制濃縮膠(間隔時間過長可能會導致分離膠部分聚合),這樣灌制濃縮膠時容易引起分離膠與濃縮膠分界面不平,影響電泳效果;
3、在灌膠過程中最好使用小燒杯或者小試管作為配膠容器,按照操作說明配制好分離膠和濃縮膠后立即先后將分離膠和濃縮膠灌入凝膠模具中,不建議使用移液器緩慢加入(由于本產品凝膠速度較快,使用移液器緩慢加入可能會導致分離膠和濃縮膠分界面不平)。
4、需要一次性制備多塊蛋凝膠時,為防止快速凝膠可以適當減少過硫酸銨的用量;
5、本產品有針對性的耐高壓凝膠系統(tǒng),可以在常規(guī)電泳緩沖液中實現(xiàn)快速電泳的目的;
6、如長期大量使用凝膠,可以用本試劑盒一次性配制多塊凝膠,作為預制膠,放入加有少量電泳緩沖液的自封袋中,與2-8℃環(huán)境下長期保存使用;
7、操作步驟中的凝膠制備是以Mini-gel的規(guī)格制定,如需要制備較大的凝膠可以適當調整試劑的用量;
8、盡管本產品對各種原料已做了調整和修飾,極大的提高了實驗操作的安全性,但是依然含有丙烯酰胺,因此操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
可制備凝膠數(shù)量:
0.75mmMini-gel |
1.0mmMini-gel |
1.5mmMini-gel |
62塊 |
50塊 |
33塊 |
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