原理:
本產(chǎn)品采用溫和洗滌配方,可在不影響目的蛋白的情況下,去除結(jié)合在印跡膜上的一抗和二抗,使同一張膜可進(jìn)行多次抗體檢測,無需反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜,節(jié)省樣品和時(shí)間,適用于使用NC或PVDF膜進(jìn)行Western Blot檢測時(shí)條件的優(yōu)化或同一樣品不同蛋白的檢測。
保存條件:
2-8℃保存,一年有效。
操作步驟:
1、將曝光后的膜取出,加入適量的再生液(再生液充分覆蓋膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15 ml左右再生液),室溫振搖孵育15分鐘左右(孵育時(shí)間應(yīng)根據(jù)不同的目的蛋白來調(diào)整:比如內(nèi)參抗體等表達(dá)量較高的蛋白,使用再生液時(shí)可以延長孵育時(shí)間至1小時(shí)或者在37℃孵育30分鐘);
2、棄去再生液,用15 ml緩沖液(PBST或TBST)洗膜3次,每次5分鐘,室溫振搖;
3、為了檢測酶標(biāo)二抗洗脫是否完全,此時(shí)可以用顯色方法來確定二抗是否洗脫掉;
4、待檢測完畢,確認(rèn)膜上無殘留的酶活性,再生后的膜通過加入15 ml的封閉液進(jìn)行封閉,室溫30分鐘或者4℃封閉過夜;
5、重新加入待測一抗,進(jìn)行下一輪的WB實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1、建議先檢測表達(dá)量較低的目的蛋白,用再生液處理后檢測表達(dá)量高的蛋白,如內(nèi)參蛋白等;
2、請佩戴手套操作。1、最快速的電泳操作: 一次性...
antiRabbit IgG antibody, anti-...
Minute 膜蛋白提取試劑盒通過離...